抗凝血酶-Ⅲ

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概述

人体内与凝血系统功能相拮抗的是抗凝血系统,在正常情况下,两者保持动态平衡,从而维持血液血管内的正常流动。抗凝血酶Ⅲ是抗凝系统中最重要的成分,它由肝脏合成,为一种多功能的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制凝血酶生成,具有强大的抗凝活性.占血浆抗凝酶活性的70%。

抗凝血酶-Ⅲ的医学检查

检查名称

抗凝血酶-Ⅲ

分类

临床血液检查 > 出血和凝血检查

化验取材

血液

抗凝血酶-Ⅲ的测定原理

在含有抗AT-Ⅲ抗血清抗体)的琼脂凝胶板孔中,加入受检血浆或血清抗原),进行电泳,抗原和抗体会形成特异地火箭样免疫沉淀峰。沉淀峰的高度与样品中AT-Ⅲ的抗原量成正比关系。

试剂

(1)兔抗人AT-Ⅲ血清。

(2)巴比妥-盐酸缓冲液pH值8.2):巴比妥钠47.6g,溶于3L水中,加1.17mol/L盐酸(浓盐酸193ml加水1807ml)55ml,测pH值,并以盐酸校正pH值至8.2,然后用水补足总量至4265ml。

(3)标准血浆。

(4)4.4mmol/L磷钼酸溶液

操作方法

(1)将溶解后的兔抗人AT-Ⅲ血清(试剂A)按瓶签标示稀释倍数的一半,用电泳缓冲液稀释备用。另用水配成20g/L浓度的琼脂糖溶液。将上述两种溶液在56℃等量混匀,倾入夹有80mm×80mm×1.5mm“U”形模框的两块玻板中,待凝固后,于板之一侧打一排加样孔,孔径2mm,孔距3mm。

(2)将溶解后的标准血浆(试剂B)用水作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16的稀释,样品也用水作1∶5稀释,然后用微量加样器分别定量加入加样孔,每孔5μl,于15V/cm电势梯度下,电泳6h(加样孔应置于负极侧)。

(3)电泳完毕,将凝胶板置4.4mmol/L磷钼酸溶液中,固定15min,量取各火箭峰,自加样中心至峰尖的高度(mm)。以不同稀释度标准血浆的峰高(X)对相应的AT-Ⅲ抗原含量(Y)在正坐标纸上制作标准曲线。再将样品的峰高在标准曲线上直接读出AT-Ⅲ抗原含量;亦可作直线回归运算,得回归公式Y=bx+a,将样品的峰高代入式中x,即得出ATⅡ∶Ag的含量Y。

正常值

260~320mg/L。

化验结果临床意义

(1)AT-Ⅲ缺乏或减少:见于:①先天性AT-Ⅲ缺陷,按AT-Ⅲ∶Ag和AT-Ⅲ∶a测定结果分为交叉反应物质阴性型(即AT-Ⅲ∶Ag与AT-Ⅲ∶a均减低)及交叉反应物质阳性型(即AT-Ⅲ∶Ag正常而AT-Ⅲ∶a减低),②获得性AT-Ⅲ缺乏,见于严重肝脏疾病、DIC外科手术后、血栓前状态和血栓性疾病等(如肾小球疾病恶性肿瘤、心脑血管病)。

(2)AT-Ⅲ增高:见于血友病,口服抗凝剂和应用黄体酮药物再生障碍性贫血心瓣膜病尿毒症,肾移植

附注

(1)样品采用0.109mol/L枸橼酸钠抗凝,而不用肝素抗凝。

(2)样品不可反复冻融。

相关疾病

再生障碍性贫血


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