抗-ds-DNA
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概述
抗双链DNA抗体（抗ds DNA）是抗DNA抗体中的一种。其反应位点位于DNA脱氧核糖磷酸框架上。抗ds DNA主要出现于SLE患者的血清中，对SLE患者的组织器官损伤有致病作用。在SLE患者血循环中，大分子的DNA浓度显著高于正常人，DNA还可与多种器官的微血管结构包括肾小球基底膜上的硫酸乙酰肝素（heparansulfate）结合，抗dsDNA抗体可与这些循环中的和器官原位的DNA分子反应，形成抗原抗体复合物，激活炎症系统如补体活化途径，导致组织损伤。也有人认为，致病性抗DNA抗体在肾脏中的沉积并非只取决于抗DNA抗体与DNA的结合，而是通过与基底膜上硫酸乙酰肝素、层粘连蛋白（laminin）、心磷脂等非DNA抗原的交叉反应或静电引力作用固定于肾脏，诱导炎症反应。抗DNA自身抗体中有的有致病性，有的没有致病性。致病性的抗DNA抗体具有以下特性：亲和性高，能与补体结合，能结合dsDNA，带正电荷，多反应性，为IgG类。近年来的研究发现，抗DNA抗体能穿入活的淋巴细胞，干扰细胞功能，引起细胞凋亡，抗dsDNA抗体也能进入肾小球膜细胞，引起肾小球细胞增殖，促细胞融合和蛋白尿形成。这可能是致病性抗DNA抗体的另一特征。
抗-ds-DNA的别名
anti-dsDNA，抗双链DNA抗体
抗双链DNA抗体的医学检查
检查名称
抗双链DNA抗体
分类
抗双链DNA抗体的测定原理
目前，测定抗dsDNA的常用方法有4种，它们的原理分述如下：
（1）绿蝇短膜虫（crithidia luciliae，CL）间接免疫荧光（IIF）或免疫酶染色（EIS）法：CL属于血鞭毛虫属，它有一个大的含纯净dsDNA的线粒体即动基体（kinetoplast），其抗原浓度较Hep-2细胞核或肝细胞核中抗原浓度高10倍，待测血清中的抗dsDNA抗体可与之结合（抗ssDNA不能）。在分布有一定浓度CL的抗原片上，IIF法是依次滴加稀释的待测血清，反应后洗片，滴加荧光荧光素标记的抗人IgG，反应后洗片，片干后于荧光显微镜下观察。抗dsDNA阳性时，CL动基体处出现黄绿色荧光。EIS法原理与IIF法类似，仅以酶标记抗人IgG代替荧光素标记抗体，加酶底物呈色后于普通显微镜下观察，抗dsDNA阳性时，CL动基体被特异地染色。
（2）放射免疫分析法（Farr试验）：用放射性核素（如125Ⅰ）标记dsDNA，加入待测血清后抗dsDNA可与标记dsDNA结合，经50%饱和度硫酸铵盐析。将结合抗dsDNA的标记抗原与未结合的标记抗原分开（前者在沉淀中，后者在上清液中），再用γ计数仪分别测定放射性，计算出抗dsDNA结合率。并据此判定抗dsDNA的有无。
（3）酶联免疫吸附试验（ELISA）：基本原理是将dsDNA包被于聚苯乙烯等固相载体微孔中，依次加入待测血清、酶标记抗人IgG或酶标记金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）、酶底物呈色。每种反应物加入后在一定温度下温育30～60min，彻底清洗后再加下一反应物。呈色程度可用酶联检测仪测定吸光度（A）反映，并据此判定检样中有无抗dsDNA。此法的关键之处是dsDNA很难包被于固相载体上，必须将微孔反应板用鱼精蛋白、多聚赖氨酸、戊二醛等做预处理。
（4）滴金免疫渗滤试验（dot immunogold filtration assay，DIG-FA）：此法原理与酶免疫斑点试验大致相似，但以胶体金标记的抗体代替酶标记抗体。预先用亲和素（avidin）或链亲和素（strep-tavidin）包被硝酸纤维素（NC）膜，再将生物素化的dsDNA结合于其上，将此NC膜固定于渗滤盒中央的圆孔处，其下以吸水填料充实。检测时依次滴加待检血清（如含抗dsDNA，则可与NC膜上dsDNA结合）、洗涤液、金标记SPA、洗液，可在1～2min内完成全部操作。抗dsDNA阳性时，NC膜上包被dsDNA处可出现红色圆点。
试剂
同IIF法、EIS法、DIG-FA法。
操作方法
同IIF法、EIS法、DIG-FA法。
正常值
健康人血清1∶10稀释为阴性（绿蝇短膜虫法）。
健康人结合率≤20%（放射免疫分析法Farr试验）。
一般以待测血清A值/阴性对照A值（P/N）≥2.1为阳性，正常人P/N值＜2.1（ELISA法）。
正常人为阴性（NC膜上不出现着色点）（滴金免疫渗滤试验）。
化验结果临床意义
抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体，检出率40%～70%。高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据，也是疾病活动性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外，也可用于临床病程和治疗效果的监测，对判断预后也有一定价值。但也有人报道在肝脏疾病、青少年型类风湿性关节炎，乃至正常人中发现低滴度抗dsDNA。
附注
上述几种检测技术的特异性都不是100%的。例如，绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA，但可能含少量组蛋白，放免法、ELISA法、滴金渗滤法等用作抗原的dsDNA，也常常含有ssDNA，而即使污染的ssDNA不足1%，引起的假阳性即可高达6%。因此，对抗dsDNA的检测结果应结合临床分析，必要时应动态观察。此外，鉴于检测试剂中DNA抗原的来源不同，碱基组成和顺序可能有一定差异，使抗体结合的表位发生变化。
相关疾病
类风湿性关节炎
