流行性出血热病毒抗体
目录
概述
当人体感染流行性出血热病毒后不久,在血清中就可检测到EHF-IgM,在7~10天内达高峰。而EHF-IgG在发病后2周才出现,可持续数年。EHF-IgM的测定对诊断断早期流行性出血热感染有重要价值。
流行性出血热病毒抗体的医学检查
检查名称
流行性出血热病毒抗体
分类
血清学检查 > 病毒的血清学检查
化验取材
流行性出血热病毒抗体的测定原理
间接免疫荧光法:以感染EHF病毒的细胞涂片为靶抗原片,加受检血清,待反应后,用荧光素(FITC)标记的抗人IgM染色,根据有无特异性荧光显色的细胞判读结果。
试剂
抗原片和FITC标记抗人IgM国内有现成试剂市售。抗原片制备原则是取业经EHF病毒感染的Vero E-6细胞培养物,制成分散的细胞悬液,滴加于灭菌处理的10孔涂膜载玻片上,置湿盒5%二氧化化碳环境下,继续培养16~18h,使细胞贴于玻片上,继经洗涤,丙酮固定,干燥密封后置-20℃保存。同法制备未感染Veto E-6细胞涂片供对照用。
操作方法
(1)用5mmol/L PBS(pH值7.2)将受检血清作倍比稀释后,滴加于抗原片上,放湿盒内37℃ 45min。
(2)用PBS洗涤3次,每次浸洗3min,振荡2min、吹干,滴加0.1g/L伊文思蓝-PBS配制的FITC标记抗人IgM,同法保温,洗涤吹干。
(3)用无荧光聚乙烯醇-甘油胶封片,置荧光显微镜下观察,凡细胞浆内呈现点或片状特异性荧光则为阳性,按阳性细胞数量和荧光强度分(+)~(++++),并以呈阳性的血清最高稀释度的倒数为受检标本中的抗体效价。
正常值
阴性。
化验结果临床意义
EHF-IgM阳性见于流行性出血热。
附注
国内有用相同的抗原片,以酶标记抗人IgM抗体替代荧光抗体,进行酶免疫定位测定也获得同样效果。
(1)以抗EHF病毒单克隆抗体与载体结合成固相化,用以捕获特异性抗原,加待测血清反应后,继加酶标记抗人μ链识别,并使底物显色。
(2)以抗人μ链包板,捕获待测血清中IgM,再加EHF病毒抗原,最后用酶标记抗EHF病毒单克隆抗体结合物,识别,并使底物显色。
ELISA所用抗原由EHF病毒感染的乳鼠脑组织悬液制取,其余试剂、操作步骤同一般ELISA。
相关疾病
流行性出血热