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血清肌酸激酶

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创建页面,内容为“== 概述== 肌酸激酶CK)又称肌酸磷酸激酶,能可逆地催化肌酸和三磷酸腺苷生成磷酸肌酸和二磷酸腺苷的...”
== 概述==

[[肌酸激酶]]([[CK]])又称肌酸[[磷酸]]激酶,能可逆地催化肌酸和[[三磷酸腺苷]]生成[[磷酸肌酸]]和二磷酸[[腺苷]]的[[反应]]。在pH中性条件下,逆反应为正反应的2~6倍,即以[[ATP]]生成为主,以保证[[组织]][[细胞]]的供能。而正向反应利于[[线粒体]]内[[氧化磷酸化]]生成的ATP,以磷酸肌酸的形式进入[[细胞液]],满足细胞生理[[活动]]之[[需要]]。CK广泛存在于[[骨骼肌]]、[[心肌]]和脑组织中,以[[横纹]]肌最多,心肌和脑组织中次之。而[[肝脏]]、[[红细胞]]和其他[[器官]]均不含此酶,[[血清]]中含量极微。CK测定主要有肌酸显色法、酶偶联法,还有[[荧光]]法和生物发光法。

== 血清肌酸激酶的医学检查==
检查名称
血清肌酸激酶 分类
[[血液]][[生化]][[检查]] > 酶类测定 取材
血液 血清肌酸激酶的测定原理
(1)肌酸显色法:磷酸肌酸和二磷酸腺苷([[ADP]])在CK[[作用]]下生成ATP和肌酸,后者与双乙酰和α萘酚结合生成红色[[化合物]],其颜色的深浅与[[酶活性]]成正比。

(2)酶偶联法:CK催化ADP与磷酸肌酸之间的反应,产生ATP,偶联己糖激酶([[HK]])及[[葡萄糖]]-6-磷酸脱氢-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的催化反应。HK催化葡萄糖被ATP磷酸化,形成葡萄糖-6-磷酸(G6P)。G6PD催化G6P被NADP+氧化成6-磷酸葡萄糖酸内酯(6-PG)和NADPH,后者的生成速率与CK活性成正比。 试剂
(1)肌酸显色法:

①Tris-HCl[[缓冲液]](pH7.4):称取Tris 2.42g,加[[蒸馏水]]100ml,0.2mol/L HCl 88.8ml,无水[[硫酸镁]]0.34g,调pH至7.4,室温可[[保存]]数月。

②12mmol/L磷酸肌酸[[溶液]]:称取磷酸肌酸钠盐43.6mg,加蒸馏水10ml,[[溶解]]后于-25℃或冰箱内冰盒中保存。

③4mmol/LADP溶液:称取ADP钠盐23.3mg,加蒸馏水10ml溶解,保存-25℃或冰盒中。

④混合底物溶液:临用前将试剂1、2及3等量混合,在9ml混合液中加[[盐酸半胱氨酸]]31.5mg,调pH7.4,置冰盒中可保存1周。若空白管吸光度太高,表明游离肌酸产生,应弃去重配。

⑤50g/L[[硫酸锌]]溶液:准确称取ZnSO4·7H2O 5g,加蒸馏水少许溶解,并稀释至100ml。

⑥60g/L[[氢氧化钡]]溶液:称取Ba(OH)2·8H2O 6g,溶于100ml热蒸馏水中,煮沸数分钟,冷却后加蒸馏水至100ml[[过滤]]。

取5ml 50g/L ZnSO4溶液,加少许蒸馏水和[[酚酞]][[指示剂]]2滴,用Ba(OH)2溶液滴至出现粉红色为止。根据[[滴定]]结果,用蒸馏水稀释Ba(OH)2溶液,使其恰与等体积的ZnSO4溶液中和。

⑦贮存碱溶液:称取NaOH 30g,[[无水碳酸]]钠64g,加入蒸馏水溶解,并稀释至500ml,置[[塑料]]瓶保存。

⑧α-萘酚溶液:称取α-萘酚400mg,加贮存碱溶液10ml。需新鲜配制,否则空白管吸光度偏高。

⑨双乙酰溶液:先配成10g/L水溶液,冰箱可保存数月。临用前用蒸馏水作20倍稀释。

⑩1.7mmol/L肌酸标准液:精确称取无水肌酸22.3mg,加蒸馏水至100ml,冰箱可保存数月。

(2)酶偶联法:目前各实验室多购买商品试剂盒,国际临床化学联合会(IFCC)推荐的配方为:300U/L HK,2000U/L G6PD,2.0mmol/L ADP,5.0mmol/L [[AMP]],10mmol/L 5[[腺苷二磷酸]],2.0mmol/L NADP,20mmol/L NAC,30mmol/L磷酸肌酸,20mmol/L葡萄糖,10mmol/L[[醋酸]]镁,2.0mmol/L EDTA,0.1mmol/L咪唑缓冲液(pH 6.7)。

操作方法
(1)肌酸显色法:按表1操作。

混匀,在540nm波长,空白管调零比色,读取吸光度。

(2)酶偶联法:各实验室可根据本室的自动[[分析]]仪型号及说明书编程,主要参数为:340nm波长,37℃,[[标本]]与试剂体积比为1∶50,延迟时间60s,[[反应时间]]60s,动力法。 正常值
(1)肌酸显色法:8~60U/L(0.5~3.6U)。

(2)酶偶联法:男24~195U/L,女24~170U/L。 化验结果临床意义
CK测定主要用于[[心肌梗死]]的诊断,对其他[[系统]]疾病的诊疗也具有一定意

义。

(1)[[急性心肌梗死]],在发病2~4h开始升高,12~48h达到峰值,2~4天恢复正常,其升高程度较[[AST]]、LDH大,且出现早,与心肌[[损伤]]的程度基本一致,且[[心电图]]不易诊断的[[心内膜下心肌梗死]]和复发性心肌梗死时CK活性亦升高。动态[[监测]]有助于心肌梗死的病情观察和预后估计。

(2)[[多发性肌炎]]、[[进行性肌营养不良]]、严重[[肌肉]][[创伤]]等CK亦明显升高。

(3)[[脑血管意外]]、[[脑膜炎]]、全身性[[惊厥]]、[[休克]]、[[破伤风]]等CK活性亦升高。

(4)[[甲状腺]][[功能]]低下,某些[[感染]]性疾病,恶性[[高热]],剧烈运动,各种插管及手术,肌肉注射[[氯丙嗪]]、[[抗生素]]等CK亦增高。

(5)[[甲状腺功能亢进]],[[系统性红斑狼疮]],慢性[[关节炎]]及应用类[[固醇]]制剂、[[避孕药]]和化疗可使CK活性降低。 附注
(1)肌酸显色法:

①肌酐、[[精氨酸]]、胍[[乙酸]]等也可与α-萘酚及双乙酰产生颜色反应。故肾功能衰竭[[患者]]应用自身血清做空白对照,以消除肌酐的影响。

②α-萘酚为白色或略带黄色之[[结晶]],颜色过深,应在[[乙醇]]中[[重结晶]]后再用。

③[[Mg]]2+为激活剂,[[半胱氨酸]]提供巯基,氢氧化钡和硫酸锌沉淀蛋白并[[中和反应]]。

④血清CK活性>200U/L时,应用已知CK活性正常的血清稀释[[后重]]测,其结果乘以稀释倍数。

(2)酶偶联法:

①最好使用血清作标本,也可用[[肝素]]抗[[凝血]]浆,因CK活性不[[稳定]],室温仅能稳定4h,4℃仅稳定8~12h,故标本采集后应尽快[[分离]]血清,及时测定。不能及时测定,应避光、低温保存。温度升高引起的酶失活为不可逆的。

②红细胞内不含CK,轻度[[溶血]]无影响,但中、重度溶血可因红细胞内释放出的[[AK]]、ATP及G6P,使CK值假性升高。

③Mg2+、[[Ca]]2+、[[Mn]]2+对该酶有激活作用,[[Cl]]-、SO42-、PO43-、[[枸橼酸]]、[[氟化物]]可[[抑制]]其活性。

相关疾病
急性心肌梗死、破伤风、系统性红斑狼疮、[[红斑狼疮]]

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