血清肌酸激酶
目录
概述
肌酸激酶（CK）又称肌酸磷酸激酶，能可逆地催化肌酸和三磷酸腺苷生成磷酸肌酸和二磷酸腺苷的反应。在pH中性条件下，逆反应为正反应的2～6倍，即以ATP生成为主，以保证组织细胞的供能。而正向反应利于线粒体内氧化磷酸化生成的ATP，以磷酸肌酸的形式进入细胞液，满足细胞生理活动之需要。CK广泛存在于骨骼肌、心肌和脑组织中，以横纹肌最多，心肌和脑组织中次之。而肝脏、红细胞和其他器官均不含此酶，血清中含量极微。CK测定主要有肌酸显色法、酶偶联法，还有荧光法和生物发光法。
血清肌酸激酶的医学检查
检查名称
血清肌酸激酶
分类
取材
血液
血清肌酸激酶的测定原理
（1）肌酸显色法：磷酸肌酸和二磷酸腺苷（ADP）在CK作用下生成ATP和肌酸，后者与双乙酰和α萘酚结合生成红色化合物，其颜色的深浅与酶活性成正比。
（2）酶偶联法：CK催化ADP与磷酸肌酸之间的反应，产生ATP，偶联己糖激酶（HK）及葡萄糖-6-磷酸脱氢-6-磷酸脱氢酶（G6PD）的催化反应。HK催化葡萄糖被ATP磷酸化，形成葡萄糖-6-磷酸（G6P）。G6PD催化G6P被NADP＋氧化成6-磷酸葡萄糖酸内酯（6-PG）和NADPH，后者的生成速率与CK活性成正比。
试剂
（1）肌酸显色法：
①Tris-HCl缓冲液（pH7.4）：称取Tris 2.42g，加蒸馏水100ml，0.2mol/L HCl 88.8ml，无水硫酸镁0.34g，调pH至7.4，室温可保存数月。
②12mmol/L磷酸肌酸溶液：称取磷酸肌酸钠盐43.6mg，加蒸馏水10ml，溶解后于－25℃或冰箱内冰盒中保存。
③4mmol/LADP溶液：称取ADP钠盐23.3mg，加蒸馏水10ml溶解，保存－25℃或冰盒中。
④混合底物溶液：临用前将试剂1、2及3等量混合，在9ml混合液中加盐酸半胱氨酸31.5mg，调pH7.4，置冰盒中可保存1周。若空白管吸光度太高，表明游离肌酸产生，应弃去重配。
⑤50g/L硫酸锌溶液：准确称取ZnSO4·7H2O 5g，加蒸馏水少许溶解，并稀释至100ml。
⑥60g/L氢氧化钡溶液：称取Ba（OH）2·8H2O 6g，溶于100ml热蒸馏水中，煮沸数分钟，冷却后加蒸馏水至100ml过滤。
取5ml 50g/L ZnSO4溶液，加少许蒸馏水和酚酞指示剂2滴，用Ba（OH）2溶液滴至出现粉红色为止。根据滴定结果，用蒸馏水稀释Ba（OH）2溶液，使其恰与等体积的ZnSO4溶液中和。
⑦贮存碱溶液：称取NaOH 30g，无水碳酸钠64g，加入蒸馏水溶解，并稀释至500ml，置塑料瓶保存。
⑧α-萘酚溶液：称取α-萘酚400mg，加贮存碱溶液10ml。需新鲜配制，否则空白管吸光度偏高。
⑨双乙酰溶液：先配成10g/L水溶液，冰箱可保存数月。临用前用蒸馏水作20倍稀释。
⑩1.7mmol/L肌酸标准液：精确称取无水肌酸22.3mg，加蒸馏水至100ml，冰箱可保存数月。
（2）酶偶联法：目前各实验室多购买商品试剂盒，国际临床化学联合会（IFCC）推荐的配方为：300U/L HK，2000U/L G6PD，2.0mmol/L ADP，5.0mmol/L AMP，10mmol/L 5腺苷二磷酸，2.0mmol/L NADP，20mmol/L NAC，30mmol/L磷酸肌酸，20mmol/L葡萄糖，10mmol/L醋酸镁，2.0mmol/L EDTA，0.1mmol/L咪唑缓冲液（pH 6.7）。
操作方法
（1）肌酸显色法：按表1操作。
混匀，在540nm波长，空白管调零比色，读取吸光度。
（2）酶偶联法：各实验室可根据本室的自动分析仪型号及说明书编程，主要参数为：340nm波长，37℃，标本与试剂体积比为1∶50，延迟时间60s，反应时间60s，动力法。
正常值
（1）肌酸显色法：8～60U/L（0.5～3.6U）。
（2）酶偶联法：男24～195U/L，女24～170U/L。
化验结果临床意义
CK测定主要用于心肌梗死的诊断，对其他系统疾病的诊疗也具有一定意
义。
（1）急性心肌梗死，在发病2～4h开始升高，12～48h达到峰值，2～4天恢复正常，其升高程度较AST、LDH大，且出现早，与心肌损伤的程度基本一致，且心电图不易诊断的心内膜下心肌梗死和复发性心肌梗死时CK活性亦升高。动态监测有助于心肌梗死的病情观察和预后估计。
（2）多发性肌炎、进行性肌营养不良、严重肌肉创伤等CK亦明显升高。
（3）脑血管意外、脑膜炎、全身性惊厥、休克、破伤风等CK活性亦升高。
（4）甲状腺功能低下，某些感染性疾病，恶性高热，剧烈运动，各种插管及手术，肌肉注射氯丙嗪、抗生素等CK亦增高。
（5）甲状腺功能亢进，系统性红斑狼疮，慢性关节炎及应用类固醇制剂、避孕药和化疗可使CK活性降低。
附注
（1）肌酸显色法：
①肌酐、精氨酸、胍乙酸等也可与α-萘酚及双乙酰产生颜色反应。故肾功能衰竭患者应用自身血清做空白对照，以消除肌酐的影响。
②α-萘酚为白色或略带黄色之结晶，颜色过深，应在乙醇中重结晶后再用。
③Mg2＋为激活剂，半胱氨酸提供巯基，氢氧化钡和硫酸锌沉淀蛋白并中和反应。
④血清CK活性＞200U/L时，应用已知CK活性正常的血清稀释后重测，其结果乘以稀释倍数。
（2）酶偶联法：
①最好使用血清作标本，也可用肝素抗凝血浆，因CK活性不稳定，室温仅能稳定4h，4℃仅稳定8～12h，故标本采集后应尽快分离血清，及时测定。不能及时测定，应避光、低温保存。温度升高引起的酶失活为不可逆的。
②红细胞内不含CK，轻度溶血无影响，但中、重度溶血可因红细胞内释放出的AK、ATP及G6P，使CK值假性升高。
③Mg2＋、Ca2＋、Mn2＋对该酶有激活作用，Cl－、SO42－、PO43－、枸橼酸、氟化物可抑制其活性。
相关疾病
急性心肌梗死、破伤风、系统性红斑狼疮、红斑狼疮
