红细胞电泳时间
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概述
这是检测红细胞在直流电场中的泳动速度,反映红细胞表面所带电荷密度和性质的一项指标。红细胞电泳时间延长,表示红细胞和血小板所带负电荷减少,红细胞相互聚集,血液黏度升高。
红细胞电泳时间的医学检查
检查名称
红细胞电泳时间
分类
红细胞电泳时间的测定原理
红细胞表面带负电荷,在电场中向正极移动,此即细胞电泳,其电泳率(EPM)计算如下:
(公式1)
式中E为电场强度(V/cm),V为电泳速度(μm/s)。因此细胞电泳迁移率的含意是指荷电颗粒在单位电场强度下,单位时间内泳动的距离(μm·s-1/V·cm-1)。
在溶液中带负电荷的细胞周围含有相反的电荷,两种电荷相互吸引,从而在细胞周围形成双电层,当细胞在电场中泳动时,双电层间出现一种电位(称Zata电位)。Zata电位与EPM有如下关系:
(公式2)
式中η为液体的黏度,ε为液体介电常数。表面电荷密度与Zata电位有如下关系:
(公式3)
式中N为阿伏加德罗常数,D为溶液的介电常数,K为玻尔兹曼常数,T为绝对温度,Z为离子价,e为电子荷电量,Sinh为双曲函数符号,即等于。
试剂
细胞电泳仪主要由直流电源、电极,电泳室及显微镜等部分组成。目前国内大多采用方形玻璃毛细管作为电泳小室。
(1)电泳小室:采用长7~8cm,内径1mm,内径均匀的方形毛细管,其静止层在内径1/10深度处。
(2)电极:一般采用银电极,为防止电极极化最好采用银-氯化银电极。
银-氯化银电极制作。将表面光洁的银丝用乙醇或乙醚擦洗干净,以银丝作阴极,银片作阳极与1.5V电池连接,两电极均浸于0.1mol/L盐酸溶液中,于暗处电解1~2h,银丝表面便有一层紫黑色氯化银,保存于暗处备用。
(3)琼脂导管制作:取内径略大于方形玻璃管的硬质塑料管,切成2~3cm,长,注入1%的琼脂溶液(其中氯化钠的浓度为10%),冷却后备用。
(4)红细胞悬浮液的配制:取静脉血,以肝素或EDTAK2抗凝,于2000r/min离心10min,取出血浆放入小试管内,加入1滴血使其中红细胞的含量每微升1万个左右备用。也可以生理盐水或9%的蔗糖溶液作悬浮基体。但由于生理盐水离子强度高,导电性强,工作电流较大,故易生热,而影响测量结果。
操作方法
(1)将配制好的稀释的细胞悬浮液装入方形玻璃管中,然后两端套好琼脂管,装在电泳管架上后置于显微镜台上,并插入电极。
(2)接通电泳:利用倒向开关变换两电极的极性,利用测微尺,测量细胞泳动一定距离(s)所需要的时间,记录20个细胞在两端方向泳动时间的平均值,计算电泳速度(v),V=s/,利用公式(1)、(2),(3)可计算出细胞屯泳迁移率和细胞表面电荷密度。
正常值
15.02~17.32s。
化验结果临床意义
时间延长:缺血性脑卒中、心肌梗死、心绞痛、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)、闭塞性血栓性脉管炎(脉管炎)、肺心病、高血压、慢性支气管炎。
附注
影响血液黏稠度因素繁多,除血浆和血清中含有电解质、各种蛋白质、糖类、脂类以及球形链状高分子化合物外,还有红细胞的大小及形态,同时受地点、湿度、气候、季节、时差、环境因素的影响。
相关疾病
冠状动脉粥样硬化性心脏病、闭塞性血栓性脉管炎、慢性支气管炎