鼠红细胞花环形成试验
概述
B淋巴细胞与抗体合成有关，是体液免疫反应的效应细胞。B细胞表面带有膜表面免疫球蛋白（SmIg）、Fc受体及补体受体等。它可与抗原抗体复合物的Fc段牢固结合。选用鸡或羊红细胞，用相应的抗红细胞抗体致敏成EA复合物，B细胞的Fc受体能与EA结合形成花环，称EA花环。如果EA复合物再加上补体，与B细胞的补体受体结合，则形成EAC花环。B细胞表面有鼠RBC受体，能与小鼠RBC结合，形成鼠红细胞花环（M-RFC），主要结合于带有IgM受体的B细胞上，形成M-RFC的多为幼稚B细胞。本试验临床上主要用于检测B淋巴细胞的数量及判断体液免疫水平。
检查名称
鼠红细胞花环形成试验
分类
鼠红细胞花环形成试验的原理
人的B细胞有小鼠红细胞受体，故能与小鼠红细胞（MRBC）形成花环，测定MRBC花环形成细胞（MRFC），可作为B细胞计数的一种方法。
试剂
（1）淋巴细胞分层液。
（4）Alsever液。
（5）肝素溶液（500u/ml）。
（6）小鼠红细胞悬液：选健康成年小鼠，每只小鼠经心脏穿刺取血约0.5ml，加等量Alsever液，4℃保存待用，可保存1周。
操作方法
（1）取1ml上述小鼠红细胞悬液，加3ml生理盐水混匀，1500r/min，离心10min，共洗3次，最后用生理盐水配成1%小鼠红细胞悬液（约1.4×108个细胞/ml）。
（2）取受检者1.5ml肝素抗凝血，用淋巴细胞分层液分离淋巴细胞，用含20%小牛血清Hank液调整细胞浓度为2×107/ml。
（3）取淋巴细胞悬液0.1ml，加等量1%小鼠红细胞悬液，混合后置37℃水浴10min，500r/min，离心10min，放4℃冰箱2～3h。
（4）用毛细管吸取0.05ml上清液，加1滴2g/L美蓝溶液，轻轻旋转使混匀，取1滴混合物放在玻片上，覆以盖玻片，待细胞下沉后，用高倍镜检查。
正常值
结果：镜下计数200个淋巴细胞，凡吸附3个或3个以上小鼠红细胞的淋巴细胞为B淋巴细胞，计算出小鼠细胞花环（ME花环）的百分率。正常人外周血ME花环百分率为5%～10%。
化验结果临床意义
慢性淋巴细胞白血病患者外周血液的ME花环百分率高达60%～80%，而无丙种球蛋白血症、严重联合型免疫缺陷等，ME花环百分率减低或缺如。
（1）升高：慢性淋巴细胞性白血病、系统性红斑狼疮。
（2）降低：急性非淋巴细胞性白血病、低丙球蛋白血症、选择性IgG、IgM、IgA缺乏症、淋巴瘤、肾病综合征、骨髓瘤、放射病、应用免疫抑制剂。
附注
（1）温育时间：ME花环百分率随温育时间延长而逐渐增加，温育1h，ME百分率为7.4±3.1%，而温育18h，增至18.3±3.8%，温育72h后，花环数又逐渐降至3.4±7.1%。
（2）培养液：以用Tc199培养液最为适宜，其结果及重复性均好。用Hepes缓冲的RPMl 1640培养液洗涤和重悬淋巴细胞和红细胞，导致细胞趋向聚集，而形成大块细胞，从而产生不可靠的结果。
（3）红细胞与淋巴细胞的最适比例约为35∶1，比例＞60∶1，或比例＜25∶1时，ME花环数可减低。
（4）保存MRBC的培养液：在Alsever液中，MRBC 4℃保存1周仍可产生稳定的花环数，而在PBS，生理盐水或Tc199培养液中保存的MRBC，随着保存时间延长，花环数逐渐下降，保存72h后，只能看到小数花环或无花环形成细胞。
相关疾病
慢性淋巴细胞白血病
