抗-HBs
目录
概述
HBV感染和免疫注射HBV疫苗都可产生抗-HBs(HBsAb)。HBsAb有IgM和IgG两型,前者发生在感染早期,后者发生稍后,它是一种保护性抗体,有良好的中和作用,并能在血清中长期存在。抗HBs是HBV感染后主要的保护性抗体,一般出现于HBsAg消失后,在乙肝恢复期缓慢上升,可持续多年。抗HBs阳性表示急性乙肝或隐性感染已经恢复,并具有对HBV的免疫力,注射乙肝疫苗后,血清中出现抗HBs是免疫成功的标志。
抗-HBs的别名
乙型肝炎表面抗体;HBsAb
抗-HBs的医学检查
检查名称
抗-HBs
分类
取材
抗-HBs的测定原理
采用纯化HBsAg包被反应板,加入待测标本,同时加入HBsAg-HRP,当标本存在抗-HBS时,该抗-HBS与包被HBsAg结合并与酶结合物形成HBsAg-抗HBS-HBsAg-HRP复合物,加入TMB底物产生显色反应,反之则无显色反应。
试剂
0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6(Na2CO3 0.16g、NaHCO3 0.29g,NaN3 0.02g,加蒸馏水至1000ml,4℃保存);0.05mol/L PBS-Tween20缓冲液,pH7.4(NaCl 8g,KH2PO4 0.2g,NaH2 PO4·12H2O 2.9g,KCl 0.2g,Tween20 0.5ml,加蒸馏水至1000ml);0.02mol/L Tris-HCl-Tween 20缓冲液,pH7.4(Tris 2.42g,1mol/L HCl 3ml,Tween 0.5ml,加蒸馏水至1000ml)。抗HBs·IgG(包被用),辣根过氧化酶标记抗HBs(抗HBs·HRP)和底物(邻苯二胺)随药盒配备或自购。
操作方法
(1)取用碳酸盐缓冲液作适当稀释的抗HBs·IgG(用抗HBs血清自提或随药盒配备)包被聚苯乙烯反应板,每孔加0.1ml(最后1孔不加,作为空白)。加盖,放4℃ 24h。次日用Tris-HCl-Tween20缓冲液洗涤3次,最后将板倒置于吸水纸上,使各孔液体流尽。
(2)各孔加入待测血清0.1ml(观察滴度可作不同稀释)。每板同时做阳性血清和阴性血清对照。加盖,置37℃ 2h后移去各孔液体,如上法洗涤3次。
(3)各孔加入底物溶液(0.1mol/L Na2HPO4 5.14ml,0.05mol/L枸橼酸4.86ml,邻苯二胺4mg,3%H2O2 0.05ml,避光,临用时配制)0.1ml,置室温暗处15~30min。待阳性对照孔充分显色后,各孔加入2mol/L H2SO4 0.05ml终止反应。
正常值
阴性
化验结果临床意义
抗HBs是HBV感染后主要的保护性抗体,一般出现于HBsAg消失后,在乙肝恢复期缓慢上升,可持续多年。抗HBs阳性表示急性乙肝或隐性感染已经恢复,并具有对HBV的免疫力,注射乙肝疫苗后,血清中出现抗HBs是免疫成功的标志。
阳性(或滴度升高):既往感染乙型肝炎病毒。
(1)乙型肝炎感染是否有免疫力的检测指标。
(2)判断人群对乙型肝炎病毒的免疫水平。
(3)筛选乙型肝炎表面抗体阳性血源,制备高滴度抗乙型肝炎免疫球蛋白。
(4)判定乙型肝炎疫苗母婴阻断率和保护率。
附注
(1)试剂使用前应摇匀,并弃去l~2滴后垂直滴加,注意均匀用力。
(2)从冷藏环境中取出的试剂盒应室温平衡30min再进行测试,余者应及时封存,置冰箱内储藏备用。
(3)冷藏的待查标本需置室温平衡30min,再可检测。
(4)待检标本不可用NaN3防腐。