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概述
骨髓有核细胞分类计数是分析骨髓中各主要造血系统细胞的比例,以及被检查时同一系统造血细胞所处的各个发育阶段比例是否正常。
骨髓其他细胞的医学检查
检查名称
骨髓其他细胞
分类
骨髓细胞学检查 > 骨髓检查
化验取材
骨髓
骨髓其他细胞的测定原理
采用骨髓小粒丰富,制片厚薄均匀的涂片,经瑞氏-姬姆萨混合染色后于显微镜下检查细胞质和量的变化。
试剂
(1)瑞氏染色液:瑞氏染粉1g,置洁净干燥的研钵内,加甘油3~5ml,研磨片刻,使瑞氏染粉充分溶解,加甲醇约50ml,继续研磨片刻后,收集上层染液;残余部分再加甲醇50ml研磨,再收集上层染液,重复几次后,用甲醇冲洗研钵,倒入同一瓶内,最后加甲醇至500ml。开始几周应经常振摇染色液。染色液存放的时间越长,染色效果也越佳。此外,研磨时染粉内应先加甘油,以免染粉在研磨过程中结成块,更易溶解。染粉未经研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。
(2)姬姆萨浓缩染液:将姬姆萨染粉3.8g放入纯甘油250ml中,置60℃水浴2h,溶解后加60℃预热的甲醇250ml混匀,于室温,棕色瓶内保存,配后数天即可使用,可长期保存。
(3)pH6.5磷酸盐缓冲液:磷酸二氢钾1.5g,磷酸氢二钠1.0g,加蒸馏水到5000ml。最后纠正pH6.5。
(4)姬姆萨稀释液:取姬姆萨溶液50ml,加pH6.5磷酸盐缓冲液到500ml,混匀。此液为姬姆萨应用液,可直接作涂片复染用。作瑞氏稀释液时,取此液10~20ml加蒸馏水至100ml,混匀即可。
操作方法
(1)骨髓取材:取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等。两岁以内小孩最好用胫骨,成人常取髂后上棘,此部位穿刺方便,病人也易接受。穿刺前要求严格消毒,杜绝细菌感染,除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外,还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期。戴手套要熟练,避免手套接触未消毒物品。穿刺针进入髓腔时常有脱空感,吸取前针筒内应留有1ml左右的空隙,否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出。针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干,以免溶解细胞。吸液量一般控制在0.2ml左右,因吸量过多,易被外周血稀释。部分病人干抽或吸出量太少时,不要将针头立即拔出,可边抽边调节针头深浅,或边抽边缓慢外移针头,最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片,以减少病人痛苦。
(2)涂片:骨髓取出后应立即注在一块斜放的玻片上,使多余的外周血自然下流,用推片刮取上部较多小粒的髓液在另一干净玻片上推片。玻片最好事先经稀硝酸液浸泡后用水冲洗,然后用蒸馏水浸泡,应避免用铁锈的烤箱烘烤或用铁丝筐盛放,以减少由铁剂污染而造成的铁染色假阳性。同时,做过细菌检查的玻片,最好不要再用于骨髓片检查。
(3)染色:选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片,自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记。加瑞氏染色液8~12滴,癢列表|二级甲等]]
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