纤维蛋白肽A
目录
概述
纤维蛋白肽A（fibrinopepide-A，FPA）是在凝血酶作用下，纤维蛋白原α（A）链的精-16和甘-17之间的肽链裂解，释放出由1～16个氨基酸组成的纤维蛋白肽A。是反映体内凝血活性及纤维蛋白最终形成血栓的可靠指标。
纤维蛋白肽A的别名
FPA
纤维蛋白肽A的医学检查
检查名称
纤维蛋白肽A
分类
取材
血液
纤维蛋白肽A的测定原理
纯化的人FPA包被于固相，液相中的待测FPA竞争抑制抗人FPA与固相FPA的结合，再以酶标记的二抗检测结合于固相的抗人FPA的量，从标准曲线计算标本中FPA的含量。
试剂
（1）纯人纤维蛋白肽A（FPA）。
（2）兔抗人FPA血清。
（4）皂土（bentonite）、邻苯二胺（OPD）、肝素、BSA等。
（5）抑肽酶（aprotinin）。
（6）包被缓冲液：0.05mol/L Na2CO3/NaHCO3缓冲液（pH9.5）：配法是1.59g Na2CO3，2.93gNAHCO3与0.2gNaN3，溶于1000ml蒸馏水中，4℃保存1周内使用。
（7）洗板液：（PBSVTween20，pH7.4）8.0g NaCl，0.2g KH2PO4，2.98g Na2HPO4·12H2O，0.5mlTween20，0.2g NaN3溶于1000ml蒸馏水中。
（8）标本稀释缓冲液:在上述洗板液中加3mg/ml的明胶，临用前新鲜配制。
（9）皂土吸附缓冲液（pH18.95）：584mg NaCl与605mg Tris共溶于90ml蒸馏水中。以浓HCl调PH8.95，加入BSA 100mg。
（10）底物缓冲液（pH5.0）由0.05mol/L柠檬酸与0.1mol/L Na2HPO4配成。临用前称取10mg邻苯二胺溶于25ml此液中,加入30%H2O210μl,混匀。
（12）透析型酶标仪。
操作方法
（1）血浆标本的采集：用塑料注射器顺利取静脉血4.5ml（开始的2ml弃去），加入盛有0.5ml抗凝剂（肝素钠500u和aprotinin 5000u）的试管中，立即混匀。3000r/min离心20min，分离血浆，吸上层血浆至另一试管，立即作下一步处理或置－20℃保存。
（2）血浆标本的皂土吸附处理：目的是彻底除去纤维蛋白原。40mg皂土加入45ml的聚丙烯塑料离心管中，加入0.5ml吸附缓冲液，充分混匀，加入1ml血浆，在回旋混合器上震荡混匀，再缓慢震摇10min。5000r/min离心15min，吸取上清液至另一试管，再如上法以皂土吸附处理1次。然后吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20溶液50μl的试管中，混匀。最终标本已稀释20倍。
（3）FPA包被：取1μg/ml的FPA溶于包被缓冲液中，加入聚苯乙烯反应板，200μl/孔，加盖，37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次，每次3min，甩干，备用。
（4）FPA标准品：以标本稀释缓冲液配成；25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中，再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人FPA。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h。
（4）从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的FPA的反应板各孔中，置板于37℃保温2h，洗板5次，甩干。
（6）各孔加HRP-羊抗兔IgG（以标本稀释液稀释至工作浓度）200μl/孔，置板于37℃温育2h，洗板5次,甩干。
（7）各孔加新鲜配制的底物液200μl，37℃避光精确反应3min，各孔立即滴加3mol/L H2SO4 50μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值（492nm）。
正常值
1.2±0.8μg/L。RIA法<2μg/L。
化验结果临床意义
FPA是纤维蛋白原在凝血酶的作用下的降解产物，因此，它是血管内凝血酶生成的标志。通常将FPA>2μg/L作为血凝亢进的指标。FPA定量主要用于DIC的早期诊断和DIC抗凝治疗的监测试验。在DIC患者使用肝素开始后，如FPA下降，表明治疗有效。也是血栓性疾病、心肌梗塞、冠心病、白血病、肾脏病的诊断指标之一。因为FPA自肾排泄，故肾功能不良时也增多。FPA在体内的半衰期短，在抗凝疗法时其变动出现的也早，所以FPA测定可用于DIC抗凝疗法的监护检查。
血浆FPA含量增高反映凝血系统激活和凝血酶的生成。因此见于高凝状态和血栓性疾病，原发性和继发性纤溶的鉴别，抗凝治疗过程中的监测指标。
附注
（1）采血要顺利不应＞45s，且开头2ml弃去，注射器要硅化或用塑料注射器。
（2）采血后立即注入盛有抗凝剂的试管中，并在冰水中迅速混合，若需保存则以经皂土吸附处理后－20℃较妥。
