脑脊液脑膜炎球菌抗原
目录
概述
由脑膜炎双球菌、结核分枝杆菌或其他化脓性细菌引起的蛛网膜、软脑膜化脓性炎症，分别称为流行性脑脊髓膜炎（流脑）、结核性脑膜炎和细菌性脑膜炎。细菌性脑膜炎的病原菌种类和发病年龄相关。临床表现为发热、头痛、呕吐、嗜睡、惊厥、意识障碍、脑膜刺激征、颈项强直等。流脑患者皮肤可见瘀点。结核性脑膜炎以低热、盗汗等症状开始。
脑脊液脑膜炎球菌抗原的医学检查
检查名称
脑脊液脑膜炎球菌抗原
分类
化验取材
脑脊液脑膜炎球菌抗原的测定原理
金黄色葡萄球菌的细胞壁中含有一种特殊的蛋白质抗原（staphylococcal protein A，SPA）。它具有与人和多种动物（哺乳类动物）的IgG Fc段结合的特性。若将特异性IgG型抗体吸附在SPA上，使其成为致敏载体，当与其抗体相应的抗原结合，即可出现凝集现象。
试剂
（1）SPA菌体试剂的制备：
①菌种选择：已知90%以上的金黄色葡萄球菌含有SPA，每个菌体细胞壁上约有8万个SPA分子，每个SPA分子能结合两个或更多个IgG分子。100u的比容菌体能结合0.8～1.5mg IgG。但不同菌株所含SPA的量有显著差异。国际上通用的标准菌株是Cowanl株（NCTC-8530和ATCC-12598），国内引进株编号为2611。对照用不含SPA的Wood46株，国内自行分离的No1800株为含SPA株，Z12株为不含SPA株。
②菌液制备：多采用酪蛋白培养基、牛心肌浸汤琼脂，或肉浸汤营养琼脂。
将选定菌种接种在琼脂平板上，37℃培养18h，选单个菌落移种于肉汤内，37℃16～18h再移种在琼脂平板上，37℃18～24h。用0.01mol/L pH7.2PBS或含10.0g/L葡萄糖、10.0g/L 2，3，5-三苯四氮唑的PBS洗下菌苔，以3500r/min离心30min。沉淀物用PBS洗2次，按比容用含0.5%甲醛PBS配成10%细菌悬液。放室温3h，再置56℃30min或80℃15min。取出用PBS洗3次，按比容配成10%悬液，加NaN3至1.0g/L，4℃保存。
（2）抗体标记：取上述10%菌悬液1ml，用PBS洗3次后恢复至原体积，加入特异性高效价抗血清0.1ml，充分混匀，37℃30min，不时振摇，离心，用PBS洗2次，按比容用含1.0g/L，NaN3的PBS配成10%菌悬液，此即为抗体标记的SPA应用液，4℃保存。
（3）各种对照用菌株、受检标本。
操作方法
（1）玻片法：
①将受检标本与SPA应用液各1滴于玻片上混匀，2min内观察结果。
②以十号多少表示凝集强度：（＋）表示无明显凝集；（＋＋）表示有明显凝集；（＋＋＋）及（＋＋＋＋）表示凝集颗粒大，出现快，液体澄清；（－）表示全无凝集。以（＋＋）凝集为判断终点。
（2）试管法：
①将受检标本进行适当稀释，加入适量SPA应用液，混匀，放37℃水浴2～3h，每30min观察一次结果。
②在30min内有明显凝集颗粒者为强阳性；管内呈均匀混浊无凝集颗粒为阴性。
正常值
阴性。
化验结果临床意义
阳性见于流行性脑脊髓膜炎（流脑）。有助于流脑的早期诊断。
附注
（1）试验需作多种对照如未标记的SPA菌液，正常兔血清标记的SPA菌液，抗体标记的SPA菌液，抗体标记不含SPA的菌液，以证明其特异性。
（2）用前仔细检查试剂本身有无自凝颗粒。
（3）本试验的特异性取决于标记用抗血清的特异性，凝集反应的强弱取决于抗血清的效价高低，故应选用特异性强和效价高的抗血清。
（4）SPA与各种属IgG的亲和力有所不同，与猪IgG亲和力最强，依次为狗、兔、人、猴、豚鼠、小鼠和牛。与绵羊和大鼠IgG的亲和力较弱，与牛犊、马、山羊和鸡IgG则不起反应。国内常用诊断血清系用兔、山羊或马免疫制备，因此必须选用兔抗血清。
相关疾病
结核性脑膜炎、头痛、意识障碍
