血栓烷B2
目录
概述
血栓素(thromboxane,TXA2)是前列腺素中的一种,由血小板产生,具有血小板凝聚及血管收缩作用,与前列腺素作用相反,两者动态平衡以维持血管收缩功能及血小板聚集作用。TXA2生物半衰期仅30s,迅速转化为无活性的血栓素B2(TXB2)。
血栓烷B2的别名
血栓素B2;TXB2
血栓烷B2的医学检查
检查名称
血栓烷B2
分类
激素类测定 > 其他激素测定
取材
激素
血栓烷B2的测定原理
[3H]-标记物测定法:血栓素A2(TXA2)是由血小板在聚集过程中释放的一种有强烈收缩血管的活性物质,生物半衰期仅30s,迅速转化为无活性的血栓素B2(TXB2)。TXB2在生物样品中浓度甚微。目前均采用放射免疫法测定。样品中的TXB2经提取纯化,和[3H]标记高比放射活性TXB2共同竞争性与限量抗体结合。平衡后加活性炭吸附游离型[3H]-标记物,上清液加至闪烁液中,测β射线的放射性强度。从标准曲线上得出样品含量。
试剂
(1)抗血清:取TXB2(Sigma公司产品)5mg,高纯度BSA 5mg,经碳化二亚胺偶联剂作用,制成TXB2-BSA结合物,免疫家兔获得特异性抗血清。滴度达1∶32000。临用前用PBS稀释。
(2)[3H]-TXB2:比放射活性5.18TBq(140Ci)/mmol,置-20℃以下保存,临用前取37KBq(1μCi)加至10.5ml PBS中。
(3)标准TXB2贮存液(1.5μg/ml):用无水乙醇配制,放-20℃可长期保存。
(4)标准TXB2工作液:取标准贮存液2μl(3.2ng)至12mm×100mm管中,氮气吹干,加2ml PBS溶液,另取试管6只,各加PBS 1ml,将标准液作倍比稀释,此系列标准浓度为25~1600pg/ml。临用前配制。
(5)PBS、乙酸乙酯,分离剂和闪烁液配制同前列腺素测定法。
操作方法
(1)样品提取同前列腺素测定法。
(2)取8mm×75mm玻璃管,总计数管(T)加PBS 300μl,非特异结合管(NSB)加PBS 200μl,零标准管(S0)加PBS 100μl,标准曲线管(S1~7)加不同浓度标准工作液100μl,测定管加经纯化样品液100μl。
(3)向S0、S1~7和测定管加稀释抗血清100μl,放4℃ 6~12h。
(4)向所有管各加[3H]-TXB2工作液100μl,放4℃ 6~12h。
(5)除T管外,各加活性炭分离剂100μl,混匀后放4℃ 15min,离心3500r/min(4℃)15min。
(6)将上清液全部倾出至预先加有11ml闪烁液的计数瓶中,充分混合,放置12h后在液体闪烁计数器上测量放射性。
(7)在半对数坐标纸上以Logit B/B0为纵坐标,各标准管TXB2(pg)为横坐标,按直线回归法绘制标准曲线,然后依样品管的Logit B/B0值从标准曲线上求出样品管浓度,如液体闪烁计数器带有数据处理系统,可直接给出标准曲线,有关参数及样品管浓度。
正常值
血浆:男性:(132±55)ng/L;女性:(116±30)ng/L。
化验结果临床意义
血栓素水平变化见于:动脉粥样硬化、心绞痛、冠心病、糖尿病、高脂血症等增高,TXA2/PGI2比值升高易于导致血小板聚集、血栓形成,促使动脉粥样硬化和冠心病。出血、损伤和内毒素休克动物血浆中TXB2显著增加,这与休克时肺循环阻力升高有关。
慢性肾衰患者尿中TXB2和6-酮-PGF1α下降。肾血管性高血压、肾病综合征和BATTER综合征患者尿中PG亦有显著性变化。
恶性肿瘤患者动脉组织中TXA2有所改变,PGI2、TXA2正常时,能阻止肿瘤细胞侵袭血小板进而粘附在血管表面。抑制血小板TXA2生成和增加血管内皮细胞PGI2生成的因素有抗肿瘤转移作用。
附注
相关疾病
糖尿病、高脂血症、血栓形成、肾血管性高血压、肾病综合征