泪液乳铁蛋白
概述
LF因首先在牛乳中发现,且具有很强的结合高铁的能力而得名。它是一种糖蛋白,等电点约pH7.8,分子量在75~86kD,蛋白质部分由一条多肽链组成。LF能抑制多种细菌的生长,还可促进溶菌酶的抗菌作用,与SIgA协同,抗菌活性较两者单独存在时都更强。LF存在于人体多种体液和分泌液如乳、泪、唾液、精液、尿液、胰液、胆汁及呼吸道分泌物中。人体各种体液内的LF具有相同的免疫学特性。
泪液乳铁蛋白的医学检查
检查名称
泪液乳铁蛋白
分类
泪液乳铁蛋白的测定原理
根据朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律当光线通过抗原抗体反应系统时,由于溶液中存在抗原抗体复合物,光线被吸收。吸收的量和复合物的量成正比(图1)。
E:吸光度变化率;
Io:入射光;
I:透光度;
C:溶液的浓度;
K:cd或常数;
c:分子吸光系数;
d:光路长。
(1)沉淀反应免疫比浊法:当抗体过剩时,抗原、抗体最适比值浓度范围大致呈直线。应用紫外波长(340nm)可测定抗原抗体复合物浊度。大多数光电比色计,分光光度计及自动生化分析仪均可用于比浊。
(2)乳胶颗粒被动凝集免疫比浊法:将抗体致敏在乳胶颗粒上,加上抗原时,致敏的乳胶颗粒与抗原相结合,形成大小不等的凝集块。凝集颗粒小时,光可通过;凝集颗粒大时,光散乱,透过光减少。利用此原理,可采用两种方式比浊。
①白色光乳胶颗粒比浊法:乳胶颗粒直径在0.1~0.8μm范围时,粒径大,吸光度增加,用500nm左右波长;0.1μm粒径可用585nm波长进行测定。
②近红外光乳胶颗粒比浊法:与白色光比浊原理相同,粒径0.2μm乳胶颗粒,可用940nm近红外光测定。
试剂
(1)参考标准和抗血清:可选用国内标准化产品,根据其效价进行不同浓度稀释。
(2)稀释液:聚乙二醇(PEG,MW6000)40g,NaF 20g,NaN3 0.5g,NaCl 9g,加蒸馏水溶解并稀释至1000ml,0.45μm滤膜过滤,保存备用。
(3)生理盐水:用0.45μm滤膜过滤。
操作方法
使用免疫比浊操作法。
正常值
1.04~2.23g/L
40岁后逐渐下降,70岁以上者为0.85~1.63g/L。反射泪比保留泪含量高,正常成人>3g/L。
化验结果临床意义
同溶菌酶,但更为灵敏。反映泪液LF<1g/L对干性角膜炎具有确诊价值。
附注
(1)透射比浊时,应采用颗粒吸收最强烈的波长,否则将影响曲线斜率。
(2)应保证检测仪器的良好性能,测定仪器光学系统调换零件时,应重新绘制比浊法的曲线,否则容易引起误差。
(3)比浊法易受外界条件的影响,因此,试验条件、试剂浓度、用量等要求一致,混悬液中颗粒大小要均匀,重现性好,否则将影响结果。