志贺氏菌属
志贺氏菌属(Shigella),肠杆菌科的 1属。1898年,因日本细菌学家志贺洁首先发现而得名。本属是人类细菌痢疾的病原菌,通称痢疾杆菌。
革兰氏阴性,菌体大小(0.5~0.7)×(2~3)微米,无芽胞,无鞭毛,无荚膜,有的菌株有菌毛。需氧或兼性厌氧,能在普通培养基上生长。菌落光滑圆形,微凸,无色半透明,直径约 2毫米,在液体培养基中呈均匀混浊生长。分离培养常采用肠道选择鉴别培养基。DNA 中的G+C克分子含量为50~52%。分解葡萄糖,产酸不产气。除宋内氏志贺氏菌迟缓发酵乳糖外,均不发酵乳糖,吲哚反应不定,甲基红试验阳性,VP试验阴性,不能利用柠檬酸盐,不分解尿素,不产生硫化氢,不液化明胶,赖氨酸脱羧酶阴性。对酸、高温和化学消毒剂敏感,日光直接照射30分钟或60℃10分钟即被杀死,在冰冻中能存活约3个月。
本属菌均有菌体(O)抗原,按生化反应和菌体抗原构造的不同可分为 4群39型(包括亚型)。将志贺氏菌感染豚鼠的角膜,可产生特殊症状的角膜结膜炎。因此,豚鼠角膜试验常作为本菌属新菌型的鉴定指标之一。
志贺氏菌依赖其表面的菌毛粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞上,继而穿入上皮细胞内生长繁殖,并向邻近细胞扩散。由于内毒素的作用,引起局部粘膜炎症、坏死和溃疡等症状。当内毒素被吸收入血时,可引起发热、白细胞数增加,少数病例还可引起中毒性休克或弥漫性血管内凝血。此外,痢疾志贺氏菌1型和部分 2型还能产生肠毒素,引起肠粘膜分泌增加,肠毒素对神经系统有亲和力。志贺氏菌引起的菌血症较少见。患者病后有一定免疫力,但免疫期短,也不稳固。可能与本属细菌血清型特别多、相互间无交叉免疫性有关。常用磺胺、氯霉素、黄连素等药物治疗,但易产生耐药性。减毒口服活菌苗正在研制中。
志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌,通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。CDC分类系统(1989)将生化性状相近的A、B、C群归为一群,统称为A、B、C血清群,将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢-最为常见。 细菌性痢疾是一种常见病,主要流行于发展中国家,全世界年病例数超过2亿,其中500万例需住院治疗,年死亡病例达65万。
防治原则
人工主动免疫用于预防目前尚不理想,治疗细菌性痢疾一般首选氟喹诺酮类抗生素。
生物学特性
1.形态与染色:革兰阴性短小杆菌,(2~3)μm×(0.5~0.7)μm,无荚膜,无芽胞,无鞭毛,有菌毛。
2.培养特性:需氧或兼性厌氧,液体培养基中呈浑浊生长,在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落,宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。
3.生化反应:生物化学反应分解葡萄糖,产酸不产气。除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖(一般需3-4d)外,均不分解乳糖。故在SS等选择鉴别培养基上,呈无色半透明菌落。在克氏双糖管中,斜面不发酵,底层产酸不产气,硫化氢阴性,动力阴性,可与沙门菌、大肠埃希菌等区别。志贺菌属的细菌KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,氧化酶-,不产生赖氨酸脱羧酶,氧化酶试验阴性。
4.抗原结构:志贺菌属主要有O抗原而无鞭毛抗原,个别菌型及新分离菌株有K抗原。O抗原是分类的依据,分群特异抗原和型特异抗原,借此将志贺菌属分为4群(种)40余血清型(包括亚型)。K抗原在分类上无意义,但可阻止O抗原与。抗体的结合。从生物化学特性看,除A群外,B、C、D群志贺菌均能发酵甘露醇;除D群外,A、B、C群志贺菌均无鸟氨酸脱羧酶。
A群:即痢疾志贺菌。有10个血清型,其中8型尚可分3个亚型。是惟一不能发酵甘露醇的一群志贺菌。
B群:即福氏志贺菌。有13个血清型(包括变型和亚型),各型间有交叉反应。
C群:即鲍氏志贺菌。有18个血清型。
D群:即宋内志贺菌。抗原单一,只有一个血清型。是惟一具有鸟氨酸脱羧酶的一群志贺菌,宋内志贺菌有I相和II相两个交叉变异相。I相呈S型菌落,对小鼠有致病力,多自急性期感染病人标本中分离得。II相为R型菌落,对小鼠不致病,常从慢性患者或带菌者检出。
5、抵抗力:志贺菌的抵抗力比其他肠道杆菌弱,加热60℃10min可被杀死。对酸和一般消毒剂敏感。在各群志贺菌中,以宋内志贺菌抵抗力最强。在粪便中,由于其他肠道菌产酸或噬菌体的作用常使本菌在数小时内死亡,故粪便标本应迅速送检。但在污染物品及瓜果、蔬菜上,志贺菌可存活10-20d。在适宜的温度下,可在水及食品中繁殖,引起水源或食物型的暴发流行。由于磺胺及抗生素的广泛应用,志贺菌的多重耐药性的问题日趋严重,给临床治疗带来一定困难。
致病性
致病物质:
侵袭力:菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞,诱导细胞内吞。
内毒素:破坏肠粘膜;肠壁通透性;肠壁植物神经——腹痛,腹泻,里急后重,粘液脓血便。
外毒素(志贺毒素,ST):肠毒素活性;细胞毒活性;神经毒活性。
所致疾病:细菌性痢疾,简称菌痢。
1.急性菌痢。
2.中毒性菌痢。
3.慢性菌痢。
微生物学检验
1.标本采集
尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便,选择脓血便或粘液便,必要时可用肛拭子采集。
2.检验方法及鉴定
(1)分离培养:取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。培养18~24h后选取可疑菌落进行下列鉴定。
(2)鉴定
1)初步鉴定:挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35 ℃培养18~24h,凡符合KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。
2)最后鉴定
3.与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别:可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌均为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌属因子血清(0多价A-F群或Vi)凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。