血浆皮质类固醇

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概述

皮质醇(cortisol)由肾上腺皮质束状带所分泌,在血液中以结合态和游离态两种形式存在。游离状态的皮质醇仅占10%左右,具有生物活性,并可从肾脏滤过;结合态者主要与糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)相结合,少量与白蛋白结合,无生物活性,不被肝细胞破坏,也不能从肾小球滤过。皮质醇的分泌主要受垂体分泌的促肾上腺皮质激素的调节,其分泌有明显的昼夜节律,上午8时左右分泌达高峰,以后逐渐下降,午夜零点最低。皮质醇对机体的物质代谢免疫功能和多种器官的生理功能具有十分重要的作用

血浆皮质类固醇的别名

血浆皮质醇

血浆皮质类固醇的医学检查

检查名称

血浆皮质类固醇

分类

激素类测定 > 肾上腺素测定

取材

血液

血浆皮质类固醇的测定原理

血浆中的皮质醇95%以上是与血浆中的蛋白质(CBG)相结合的形式存在。采用加热变性有机溶剂提取将结合型转变为游离型。以皮质醇-3-组胺制备125I标记物。样品中的皮质醇和125I标记物共同竞争性的与限量抗体结合。根据竞争抑制基本原理,从标准曲线直接查得血浆中皮质醇浓度。

试剂

(1)0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液:每1000ml中加明胶1g,NaN3 0.5g。放4℃保存

(2)抗血清:以皮质醇-3-BSA为免疫原,注射新西蓝兔获得抗血清,经鉴定滴度达1∶40000,与其它甾体类激素交叉反应<10%。按可供测100管的量分装,冷冻干燥。4℃保存。临用前缓冲液11ml溶解

(3)皮质醇-3-125I组胺:取皮质醇-3-组胺5μg/瓶,用常规氯胺T氧化法标记125I。硅胶G薄板层析分离。经鉴定免疫活性,按可供测100管分装,冷冻干燥,4℃保存。临用前加11ml缓冲液溶解。

(4)标准皮质醇贮存液:取经层析纯化的皮质醇1mg,加无水乙醇100ml。放-20℃可长期保存。

(5)标准液:取去激素正常人血清,每L中加25,50,100,500,1000,2000μg皮质醇。分装每瓶0.5ml,冷冻干燥,4℃保存。临用前加0.5ml蒸馏水溶解。

(6)分离剂:取100目活性炭1.2g,BSA 0.2g加缓冲液100ml,磁力搅拌20min,4℃保存。

操作方法

(1)加热变性法:

①取血浆或标准0.1ml至玻璃管中,加生理盐水0.9ml,混合,放沸水浴中5min。即刻取出冷却。

②取10mm×75mm塑料管,按表1加入样品和试剂。

③加入分离剂后放4℃ 20min,离心(3500r/min 4℃)15min。将上清倾出至计数管中,测放射性,以标准曲线直接得样品值。

(2)乙醇提取法:

①取血浆或标准血清0.1ml加至提取管中,加入60%乙醇0.9ml,置液体快速混匀器1min。离心10min。将上清移至另一管中,即为样品提取液。

②取10mm×75mm塑料管,按和变性提取法见表1相同程序加入样品和试剂。并按相同方法分离B、F,绘制标准曲线和直接得出样品中的皮质醇浓度。

(3)尿液样品测定法:

①收集24h尿液,预先向容器内加麝香草酚约0.2g作防腐剂。将尿液加蒸馏水至总量2000ml。混匀,留取10ml置4℃冰箱保存。

②取尿液1ml至提取管中,加10ml二氯甲烷在振荡器上振摇5min。吸出水相,用0.1mol/LNaOH 2ml洗涤1次,蒸馏水2ml洗两次。吸去水相,放-20℃ 30min。吸出二氯甲烷液5.0ml,氮气吹干。残渣溶于1ml含有5%乙醇的缓冲液溶解。

③取皮质醇标准贮存液(10μg/ml),用含5%乙醇的缓冲液稀释至2.5,10,50,200,800μl/L。

④取10mm×75mm塑料管,按表2加入样品和试剂。

⑤加入分离剂后,按和血浆相同方法离心分离和测量

⑥以B/B0%对标准管浓度绘制标准曲线,从标准曲线查得样品值乘4即得尿中游离皮质醇μg/L。

正常值

血浆:上午8~9时(442±276)nmol/L,下午3~4时(221±166)nmol/L。

化验结果临床意义

(1)肾上腺皮质因增生、腺瘤、癌变等所致的皮质醇增多增多症患者,其血浆、24小时尿以及唾液中皮质醇含量均明显增高,昼夜节律消失。垂体ACTH癌和异位ACTH综合征患者由于ACTH分泌增多,可致血浆皮质皮质皮质醇相应升高。各种原因所致的高糖皮质类固醇激素结合蛋白(CBG)血症血皮质醇水平明显增高。皮质醇在肥胖症以及心肌梗死脑血管意外休克等危重疾病亦可升高。

(2)皮质醇浓度下降的疾病有:原发性继发性肾上腺皮质功能减退症、家族性糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)缺陷症、Graves病、低蛋白血症、严重肝病或肾脏疾病等。长期应用糖皮质激素、镇静药、中枢性降压药等药物也可使皮质醇水平下降。

附注

因血液中皮质醇生理波动较大,早晨最高,以后逐渐降低,入睡后降至最低水平。临床上一般于早晨8时左右采血标本送检。

相关疾病

肥胖症、肾上腺皮质功能减退症


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