衣原体检查法
名称
衣原体检查法
衣原体检查法的适应证
衣原体检查法适用于非淋球菌感染者。
衣原体检查法的禁忌证
无特殊禁忌。
准备
采集待检的标本。
方法
1.直接涂片染色法
(1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。戴消毒手套后,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用接种环或棉拭子蘸取脓液,轻轻涂于载玻片上。
(3)当日配制的姬姆萨溶液染色1h。
(4)再用95%乙醇溶液淋洗涂片,干燥。
(5)油镜下阳性标本中可在上皮细胞内找到1~3个或更多呈蓝色、深蓝色或暗紫色的包涵体。
2.衣原体抗原检测法
(1)取材。
①男性患者从尿道取材时,可用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,轻轻转动后取出分泌物(应略带黏膜)。
②女性患者取材时,先用阴道窥器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宫颈口内1~2cm,转动并停留10~20s取出。
⑤对青春期前女童可采集阴道处分泌物标本。
(2)用商品试剂盒检测,检测前先将试剂盒和测试卡等室温下复温30min。
(3)加试剂至塑料管刻度处(约0.6ml),将拭子标本浸入管内摇匀,置80℃水浴,10~20min取出,转动拭子并沿管壁挤压,弃去拭子,提取液置室温冷却后盖上管盖。
(4)将测试卡置台面,加入5滴提取液于检体窗,静置30min后观察结果。
(5)质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性,结果窗无变化为阴性。
3.免疫荧光法
(1)将标本涂于玻片凹孔中或圆圈中,自然干燥,丙酮或无水甲醛固定5min,漂洗,再干燥。
(2)加30μl荧光素标记的沙眼衣原衣原体单克隆抗体试剂覆盖凹孔,玻片置湿盒中或37℃下作用15min,去掉多余试剂,用蒸馏水淋洗涂片,自然干燥,加一滴封固液,盖上盖玻片,置荧光显微镜下检查。
(3)阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的衣原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光,在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构,也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。
注意事项
1.分泌物涂片时不要用力涂擦,涂片厚薄要合适。
2.女性宫颈分泌物、咽和直肠标本在涂片中由于杂菌较多,故推荐用培养法。
3.分离培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度一定要足够。
4.培养时,取材后应立即接种,标本离体的时间越短越好。
6.氧化酶试剂应为新鲜配制(现用现配),在棕色瓶中避光保存。
7.氧化酶试剂遇铁也会变红,故接种环应非铁丝所制。
8.对症状不典型的男性患者取材,最好在其晨起排尿前或排尿4h以后。