血液葡萄糖
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概述
血清葡萄糖，其测定方法有邻甲苯胺法、葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法和干化学法。其中已糖激酶法为国际推荐的参考方法，但试剂比较昂贵，我国推荐的葡萄糖氧化酶法在国内外应用甚广，目前有些单位仍沿用邻甲苯胺法。
血液葡萄糖的医学检查
检查名称
血液葡萄糖
分类
血液葡萄糖的测定原理
（1）葡萄糖邻甲苯胺（O～TB）法测定：葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热；葡萄糖醛基与邻甲苯胺缩合成葡萄糖基胺，后者脱水生成席夫氏（Schiff）碱，再经结构重排列，生成有色化合物，吸收峰在630nm。
（2）葡萄糖氧化酶（GOD）法：葡萄糖氧化酶（GOD）能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生一分子过氧化化氢。在过氧化物酶（POD）和色原性氧受体（如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚）的存在下，过氧化化氢分解，释放出初生态氧，氧化色素原，生成有色化合物。其反应如下：
醌亚胺在480～550nm波长有最大吸收，所产生的颜色强度与血清中葡萄糖量成正比，与同样处理的标准液比较，经计算可求出血清葡萄糖的含量。
试剂
（1）葡萄糖邻甲苯胺（O～TB）法测定
①邻甲苯胺试剂：940ml冰醋酸中加入硫脲1.5g，邻甲苯胺60ml混合，直至硫脲完全溶解，置棕色瓶中，室温保存。新配试剂应放置24h后（待老化）使用。此试剂腐蚀性极强，避免接触皮肤，应用自动吸管加液。
②12mmol/L苯甲酸溶液：于900ml蒸馏水中加入苯甲酸（MW＝122.12）1.46g加热助溶，冷却后置于1L容量瓶中，加蒸馏水至刻度。
③葡萄糖标准贮存液及应用液：同血清葡萄糖氧化酶法。
（2）葡萄糖氧化酶（GOD）法
可用成套试剂盒，也可自己配制，配制方法如下：
①0.1mol/L（pH7.0）磷酸盐缓冲液：溶解无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g于800ml蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L。
②酶试剂：取葡萄糖氧化酶1200U，过氧化物酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，加上述磷酸盐缓冲液至80ml左右，调节pH至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存，至少可稳定3个月。
③酚试剂：重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中氧化成红色，可先配成500g/L的溶液，用时稀释）。贮存于棕色瓶中。
④酶酚混合试剂：酶试剂及酚试剂等量混合，在冰箱内可以存放一个月。
⑤葡萄糖标准贮存液（100mmol/L）：无水葡萄糖（预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存）。称取1.802g，以12mmol/L苯甲酸溶液溶解并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至100ml刻度处，放置2h后方可应用。
⑥葡萄糖标准应用液（5mmol/L）：吸取葡萄糖标准贮存液5ml，于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
操作方法
（1）葡萄糖邻甲苯胺（O～TB）法测定：
取数支16mm×150mm试管，按表1进行操作。
混匀后，置沸水中，加热12min，取出置冷水中冷却5min。分光光度计波长630nm，比色杯光径1.0cm，空白管调零比色，读取标准管与测定管吸光度。
（2）葡萄糖氧化酶（GOD）法：
取数支16mm×100mm试管，按表2进行操作。
混匀，置37℃水浴中，保温15min，用分光光度计波长505nm，比色杯光径1.0cm，以空白管调零比色，分别读取标准管及测定管吸光摩。
正常值
（1）空腹：
①邻甲苯胺法（O-TB）： 3.89～6.11mmol/L
②葡萄糖氧化酶法（GOD）：3.89～6.11mmol/L
④自动生化仪： 3.89～6.11mmol/L
（2）进食后2h：＜6.7mmol/L （＜120mg/dl）
化验结果临床意义
（1）升高
②糖类皮质激素增多：肢端肥大症、甲状腺功能亢进、库欣综合征、巨人症等。
⑥维生素B1缺乏：Wernicke脑病（脑性出血性脑灰质炎）。
⑨药物与化学毒物中毒：咖啡因、茶碱、ACTH、一氧化化碳和重金属中毒等。
（2）降低：
①胰岛素分泌过多：胰岛β细胞瘤、胰外肿瘤（肾上腺癌、胃癌、纤维肉瘤）、倾倒综合征、早期糖尿病、功能性血糖过低症、滋养性血糖过低症、胰高血糖素缺乏症等。
②对抗胰岛素的内分泌不足：垂体前叶功能减退症、艾迪生病、胰岛α细胞功能减退症、甲状腺功能减退症（呆小症、黏液性水肿）。
③肝脏葡萄糖供应不足：原发性肝癌、肝硬化后期、重症肝炎、重症脂肪肝、糖原贮积病（Von Gier Ke病）、半乳糖血症、长期营养不良等。
④其他：蛛网膜下腔出血、脑炎后综合征、荔枝病、亮氨酸过敏、食物摄入不足、运动、饥饿、药物（服用胰岛素或降糖药过量）。
附注
（1）葡萄糖邻甲苯胺（O～TB）法测定：
①除葡萄糖外，其他糖在反应过程中亦能产生有色化合物，它们吸光度比率分别为：葡萄糖＝1.00；果糖＝0.06；甘露糖＝0.96；半乳糖＝1.42；蔗糖＝0.16；麦芽糖＝0.09；乳糖＝0.39；木糖＝0.12。但是，在这些糖中葡萄糖、果糖和半乳糖存在于正常人血清，而后者在正常人血液中含量甚微，不影响实际测定结果。
②测定液的显色强度与反应条件有关，邻甲苯胺的批号、邻甲苯胺试剂的新、老（如试剂配制后过久，颜色变浅）以及加热温度和加热时间等都会影响显色强度。因此，测定管，标准管、空白管的加热时间与温度必须完全一致。每批测定管数不宜过多，以便能较好地控制反应条件。有些批号冰醋酸会产生棕色反应，影响测定结果。
③最终反应液偶尔会产生混浊，最常见原因是高脂血症。此时，可向3ml显色液中加入1.5ml异丙醇，充分混匀，溶解脂质可消除浊度，所测吸光度乘以1.5。注射右旋糖酐时，由于右旋糖酐不溶于邻甲苯胺试剂而产生混浊。冷水浴太冷时也可出现混浊。
④轻度溶血不影响测定，但1g/L血红蛋白能假性增高葡萄糖测定结果
0.11mmol/L，胆红质也能增高测定管吸光度，342μmol/L胆红质能假性增高葡萄糖测定结果1.39mmol/L，血标本中含有EDTA（＞1mg/ml），氟化钠（＞5mg/ml）时，能增高显色强度，麝香草酚抑制颜色生成。
⑤邻甲苯胺法的测定结果基本上与葡萄糖氧化酶法和已糖激酶法相同，但尿毒症患者，邻甲苯胺法的测定结果略有偏高。
⑥邻甲苯胺试剂有毒并有致癌性，操作应避免皮肤接触或直接吸入。
（2）葡萄糖氧化酶（GOD）法：
①葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中葡萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要从α型到β型的变旋反应。国内某些商品葡萄糖氧化酶试剂盒含葡萄糖变旋酶，可加速这一反应，但在终点法中延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型，故须放置2h以上（最好过夜），待变旋平衡后方可应用。
②葡萄糖氧化酶法测定的特异性较高，能干扰测定结果的物质很少，溶血标本血红蛋白的浓度达10g/L，黄疸标本胆红质浓度达342μmol/L。氟化钠浓度达2g/L，尿素浓度达46.7mmol/L（280mg/dl），尿酸浓度达2.95mmol/L，半胱氨酸的浓度达50mg/dl，甘油三酯浓度达500mg/dl，对测定结果均无影响，维生素C、谷胱甘肽、10mg/dl左旋多巴可能引起测定结果的负偏差。
③如果测血浆中糖，标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂较好。取草酸钾6g，氟化钠4g，加水溶解至100ml，吸取0.1ml到玻璃试管内，在80℃以下烤干使用，可使2～3ml血液在3～4h不凝固并抑制糖分解。
④方法学评价：GOD法线性范围至少可达19mmol/L；回收度94%～105%；变异系数批内为0.7%～2.0%；批间为2%左右；日间为2%～3%。准确度与精密度都能达到临床需要，操作简便，适用于常规检验。
相关疾病
脱水、糖尿病、肢端肥大症、库欣综合征、嗜铬细胞瘤、肝硬化、血色病、脑出血、化脓性脑膜炎、胰腺癌、慢性胰腺炎、烧伤、胃癌、肉瘤、倾倒综合征、甲状腺功能减退症、原发性肝癌、脂肪肝、糖原贮积病、半乳糖血症、蛛网膜下腔出血、高脂血症、黄疸
