血清尿素
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概述
尿素（Urea，ure）是哺乳动物蛋白质分解代谢的终产物。在肝脏通过鸟氨酸循环合成，主要由肾脏排泄。由于尿素的分子量小又易于溶解，扩散力极大，故脑脊液、浆膜腔积液、唾液、汗液中的尿素浓度基本一致。血尿素浓度主要受肾功能和蛋白质摄入量和分解代谢情况的影响。目前临床实验室测定尿素最常用的方法有二乙酰-肟法，酶偶联速率法。
血清尿素医学检查
分类
取材
血液
原理
（1）二乙酰-肟法：二乙酰-肟与强酸作用生成二乙酰，后者与尿素在酸性条件下，缩合成红色的二嗪衍生物。试剂中的硫氨脲和硫酸镉具有增色和稳定作用。
（2）酶偶联速率法：尿素在尿素酶作用下水解成NH4＋和CO2，NH4＋、NADH和α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下生成CO2、谷氨酸和NAD＋。由于NADH被氧化成NAD＋，在340nm吸光度降低，其吸光度降低值与尿素浓度成正比。
试剂
（1）二乙酰-肟法：
①酸性试剂：加蒸馏水约100ml于1000ml三角烧瓶中，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml，冷至室温后，加入硫氨脲50mg及硫酸镉（CdSO4·8H2O）2g，充分溶解后用蒸馏水稀释至1000ml，置棕色试剂瓶中放冰箱保存，此试剂可稳定6个月。
②二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，用蒸馏水稀释至1000ml，置棕色瓶中放冰箱保存，可稳定6个月。
③尿素标准应用液（70mmol/L）：精确称取干燥纯尿素0.420g，溶于20ml无氨蒸馏水中。并加至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，放冰箱可稳定6个月。
④尿素标准应用液（7.0mmol/L）：取10ml尿素标准应用液，用无氨蒸馏水稀释至100ml即可。
（2）酶偶联速率法：目前各厂家所产试剂盒并不完全相同。缓冲液多用0.1mol/L（pH7.5±0.1）的磷酸盐缓冲液。α-酮戊二酸5mmol/L，NADH 3.5mmol/L，尿素酶15000U/L，谷氨酸脱氢酶2000U/L，ADP 2mmol/L。
操作方法
二乙酰-肟法
①试管分别标明空白管“B”、测定管“U”、标准管“S”。
②分别于测定管加血浆（清）20μl，标准管加标准应用液20μl，空白管加蒸馏水20μl。
③各加酸性试剂3ml、二乙酰-肟试剂3ml。
④充分混匀，煮沸加热10min，取出、冷却。
⑤520nm波长，空白管调零比色、读取标准管及测定管吸光度。
附注：
①尿素不能直接与二乙酰-肟反应，加入二乙酰-肟和强酸的目的是生成能与之反应二乙酰。加入Fe3＋（或Cd2＋）是为消除反应过程中生成的羟胺的干扰，硫氨脲可使反应的敏感度提高20倍。以前许多书刊介绍的方法是将二乙酰-肟与硫氨脲配在一起。但两者可生成针状黄色物质，用硫氨脲配在酸试剂中克服了这一缺点。
②酸浓度与吸光度呈正相关，故酸浓度要准确。所用试管口径，放入沸水中的倾斜角度要尽量一致，水液面要在试管内液面之上，煮沸时间以放入试管重新沸腾计。最好每次测定标准和质控。观察尿素动态变化时，应嘱患者恒定食入蛋白，并空腹采血。样本不能立即分析时，可提取血清（或血浆）于密封样杯中，置4℃存放可稳定7天。结果大于20mmol/L时，样本改为10μl，结果乘以2。
③此法虽然加入硫氨脲和镉离子，在一定程度上增进了显色强度和色泽稳定性，但仍有褪色现象（每小时约5%），所以，煮沸加热显色冷却后，应及时比色。
④所用20μl加样器务必校正无误后方可使用。
⑤血浆（清）中尿酸、肌酐、氨基酸等含氮物对本试验无干扰，溶血可能结果偏高，黄疸可能结果偏低。
⑥血浆（清）尿素含量与进食的蛋白质含量有密切的关系。在高蛋白饮食时，血浆（清）中的尿素含量可明显升高，而低蛋白饮食时，则含量显著降低。
酶偶联速率法
试剂样品比为70∶1，37℃，340nm，延滞时间30s，读数时间30s。具体分析条件可据试剂盒和仪器的说明书确定，最好每次定标。
附注：
①该法最常出现的问题是试剂失效或反应系统被污染。试剂中最不稳定的是NADH和谷氨酸脱氢酶。在分析过程中应注意以下几个方面：如用血浆则不能用含氟化合物或NH4＋的抗凝剂，前者可抑制尿素酶活性，后者则可参与反应。
②试剂空白吸光度应大于1.2A，否则说明NADH被氧化。同种试剂、仪器，在分析条件不变的情况下，测定得F值应相对恒定，否则说明试剂失效。
③复溶试剂勿振动，以免酶变性失活。必须用无氨水复溶试剂。试剂杯、样品杯、反应杯要无氨、洁净、无酸碱污染，应每次定标，并跟测质控血清。
正常值
（1）二乙酰-肟法：2.0～7.1mmol/L。
（2）酶偶联速率法：2～7.1mmol/L。
临床意义
（1）增高：
①肾脏疾病：如急性肾衰、慢性肾炎、肾动脉硬化、慢性肾盂肾炎、肾结核、肾肿瘤晚期等，肾功能轻度受损时，BUN可无变化。当60%～70%有效肾单位受损时，BUN才增高。因此BUN测定不能作为早期肾功能受损的指标，但对肾功能衰竭，尤其是尿毒症诊断有特殊价值，并可判断病情，估计预后。根据BUN测定结果可判断肾功能衰竭的程度。A.肾功能衰竭代偿期：Ccr下降，血Cr正常。BUN正常或轻度升高（＜9mol/L）。B.肾功能衰竭失代偿期（氮质血症期或尿毒症前期）：Ccr明显下降（＜0.83ml/s），血Cr增高（＞90mmol/L），BUN中度升高（＞9mmol/L）。C.尿毒症期：Ccr＜0.33ml/s，血Cr＞445μmol/L，BUN＞20mmol/L。
②肾前性或肾后性因素引起尿量显著减少或尿闭，如剧烈呕吐、腹泻引起的脱水、水肿、腹水、循环功能衰竭，以及尿路结石、前列腺肥大、肿瘤等引起的尿路梗阻。
③体内蛋白质分解过多，如大面积烧伤、大手术以后，上消化道出血、甲状腺功能亢进及急性传染病等。此时BUN增高，而其他肾功能试验结果大致正常。
（2）降低：临床较少见。主要系肝实质受损，生成减少。如急性黄色肝萎缩、肝硬化、中毒性肝炎，严重贫血等。
相关疾病
慢性肾盂肾炎、肾结核、腹泻、脱水、腹水、烧伤、肝硬化、黄疸
