溶血酶

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溶血酶概述

溶血酶(Plasmin,PL)是PLG在其激活物(PA)的作用下产生的,是导致纤维蛋白降解最直接的因子。生理状态下,PL与PLG、t-PA等结合在血管内皮细胞表面,一旦有少量纤维蛋白形成,PLG被激活为PL,后者则在局部将纤维蛋白降解,以避免血栓形成,保证血流通畅。

溶血酶医学检查

分类

血液生化检查 > 酶类测定

原理

纤维蛋白可与染料刚果红结合成不溶于水的复合物,被检血浆中的溶血酶可水解纤维蛋白释放出刚果红,在酸性条件下刚果红显蓝色,其颜色的深浅与血浆溶血酶活性成正相关

试剂

(1)硼酸缓冲液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸馏水500ml,0.1mmol/L

NaOH溶液53ml,加蒸馏水至1000ml。

(2)1g/L刚果红溶液:刚果红0.5g加生理盐水500ml。

(3)1mol/L HCl溶液。

(4)50g/L CaCl2溶液。

(5)基质粉制备:血浆与生理盐水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混匀,37℃水浴60min,用玻棒将纤维蛋白全部卷出,用生理盐水洗涤两次后,挤干,置56℃温箱中烘干备用。取10g纤维蛋白,加1g/L刚果红溶液100ml,37℃水浴中不断搅拌,保温30min,3000r/min离心10min,弃去上清液,用pH7.8硼酸缓冲液反复洗涤至上清无色为止,将与刚果红结合的纤维蛋白置56℃温箱烘干备用。

(6)分光光度计。

操作方法

(1)按表1操作:

(2)离心上述溶液,取上清,分光光度计600nm波长比色,空白调0,测其吸光度值,查标准曲线即可得出溶血酶活性。

附注:

检测前禁止服用抗凝药物,如阿斯匹林等。

正常值

溶血酶活性:85.55%±27.83%

(发色底物法)

21.1~48.9U

(刚果红显色法)

临床意义

(1)运动对纤溶系统的影响:Weiss等为探讨运动程度(中、重)与凝血、纤溶系统的关系,检测了12例健康男性在骑踏车1h前后反映血浆凝血酶、纤维蛋白和溶血酶形成的指标。结果显示,在中等度的运动中t-PA抗原从3.7±0.5ng/ml升高到14.6±1.8ng/ml,P<0.01,PAP从2.1±0.3nmol/L升高到4.2±0.7nmol/L,P<0.01。然而,血浆凝血酶原片段1+2(pro-thrombin fragment1+2,F1+2)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(thrombin-antithrombinⅢ complexes,TAT)和纤维蛋白肽A(fibrin-opeptide A,FPA)却无明显变化。重度运动后,t-PA和PAP的水平分别超过正常高限的2.5倍及2倍,而血浆中F1+2、FAT、FPA却在正常范围内明显增高(P值分别<0.01、<0.05、<0.01)。研究认为:在健康的年轻个体中,运动导致凝血活性增高的同时也引起纤溶活性增高,中等强度运动仅导致溶血酶形成,而重强度运动时溶血酶的形成超过了凝血酶和纤维蛋白的形成。

(2)在纤维蛋白溶解亢进症的意义:机体内纤溶系统活性是由于溶血酶出现的结果,而溶血酶在血中的活性是由释放入血的激活物而调控。因此各种原因导致的纤溶亢进症,无论是先天性还是后天获得性,无论是原发还是继发性,最终结果是溶血酶生成过多而导致溶血酶活性增强。上海瑞金医院肝病患者溶血酶的检测结果显示:急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化病人血浆溶血酶明显升高,表明此时患者溶血酶活性增强。

(3)在血栓前状态及血栓性疾病中的意义:血栓前状态及血栓性疾病中常由于t-PA活性及含量减低和PAI-1活性增高而导致溶血酶活性(PL)减低。缺血性脑病患者α2-AP水平降低而溶血酶-α2-AP复合物(PAP)增高,有资料表明,缺血性脑病患者PAP水平(1.09±0.45mg/L)明显高于正常对照组(0.59±0.13mg/L)。血栓性疾病,如急性心肌梗死肺梗死、深静脉血栓肾病综合征DIC等引起的继发性纤溶亢进时PAP水平增高。Oikawa等对42例肾病综合征患儿检测了血浆PAP(PL-α2-AP)和D-Dimer等,发现在肾病综合征的活动期PAP(0.67±0.48μg/ml)及D-Dimer(154±105ng/ml)水平与其静止期(PAP 0.43±0.18μg/ml,D-Dimer 72±48ng/ml)比较具有显著性差异(P<0.01,P<0.001)。尽管临床上尚未发现血栓形成,但PAP、D-Dimer水平升高却能反映肾病综合征时的血液高凝状态。

(4)血栓性疾病溶栓治疗中的意义:在血栓性疾病如急性心肌梗死、肺栓塞静脉血栓形成等应用溶栓药物(如链激酶尿激酶、t-PA或重组t-PA等)进行溶栓治疗时,由于外源性溶血酶原激活物的作用使溶血酶原转变为溶血酶,由此而降解纤维蛋白(原)达到溶解血栓的目的。因此溶栓后溶血酶活性增高。溶血酶-α2-AP复合物(PAP或PIC)增高,有报道α2-AP与溶血酶形成的复合物(PAP)是可以灵敏地反应纤溶系统激活的分子标志物。应用溶栓药物治疗时血浆PAP可明显增高。

相关疾病

FA 肺栓塞 肝硬化 急性心肌梗死 静脉血栓 静脉血栓形成 肾病综合征 血栓形成

岩栖蝮毒素·溶血酶

分子中文名

溶血酶

分子英文名

Fibrinolytic enzyme, FLE

蛋白质序列

参考文献:

于德涵, 赵文阁,王广慧, 李贺. 2011. 岩栖蝮蛇毒溶血酶基因克隆序列分析及真核表达载体的构建与鉴定[J]. 中国农学通报, 27(14): 17-21.

生物学活性

高溶栓活性和低溶血毒性的天然优势特性。

参考文献:

Swenson S, Markland JFS 2005. Snake venom fibrin (ogen) olytic enzymes[J], Tbxicon, 45:1021-1039.

Leonardi A, Fox J, W, Trampu?-Bakija A, Kri?aj I. 2007. Ammodytase, a metalloprotease from Vipera ammodytes ammodytes venom, possesses strong fibrinolytic activity. Toxicon, 49(6): 833-842.

可能的中毒症状

短时间出现烧灼胀裂样剧痛,肢体肿胀明显,扩展迅速,伤口附近可出现水泡、血泡。全身症状很快出现,常见有全身不适、畏寒发热胸闷气促等。重者可出现全身广泛性出血,如齿龈出血、血尿、皮下瘀斑等,甚至休克

参考文献:

中国中西医结合学会急救医学专业委员会蛇伤急救学组. 2002 .毒蛇咬伤的临床分型及严重程度评分标准(修订稿)[J]. 中国中西医结合急救杂志, 9(1):19.

可能的治疗方案

早期治疗(被咬后4小时前):局部近心端大面积包扎(被咬后30min前),切开冲洗,尽快吸出毒液,烧灼伤口(野外无条件下),应用抗眼镜蛇毒血清胰蛋白酶局部注射及环封,局部切开减压,引留排毒和中草药治疗为主。中期治疗(被咬伤后4小时至需要手术修复局部组织坏死缺损创面日期)控制感染,消除局部的坏死组织、换药,促进肉芽组织生长为主,根据局部组织的坏死和缺损情况、制定相应的方案。后期治疗(手术日至治愈为止)主要为手术修复局部组织坏死照成的局部组织缺损。

参考文献:

中国中西医结合学会急救医学专业委员会蛇伤急救学组. 2002. 毒蛇咬伤的临床分型及严重程度评分标准,修订稿. 中国中西医结合急救杂志, 9(1): 19.

相关物种

岩栖蝮

数据来源

中国科学院昆明动物研究所

溶血酶药品说明书

药品名称

溶血酶

英文名称

Fibrinolysin

溶血酶的别名

纤维蛋白溶酶纤维蛋白溶解酶;纤溶酶;Plasmin;Actase;Serum Tryptase;Throblysin

分类

血液系统药物 > 纤维蛋白溶解药

剂型

5万U。

溶血酶的药理作用

溶血酶是由提纯的链激酶激活溶血酶原而得,是一种蛋白水解酶。溶血酶可使纤维蛋白分解成纤维蛋白降解物,而使纤维蛋白溶解。

溶血酶的药代动力学

(尚不明确)

溶血酶的适应证

用于血栓性疾病和抗凝疗法辅助剂。

溶血酶的禁忌证

凝血障碍、出血状态、严重肝肾功能不全、麻醉和手术后忌用。

注意事项

(尚不明确)

溶血酶的不良反应

发热、出血、恶心呕吐、心动过速、低血压眩晕头痛、肌痛、黄疸过敏反应等。

溶血酶的用法用量

静脉点滴,剂量取决于临床反应,一般每小时5万~10万U,每天用1~6h,连用3~4天,并密切监测凝血功能。

溶血酶与其它药物的相互作用

(尚不明确)

专家点评

溶血酶是由提纯的链激酶激活溶血酶原而得,是一种蛋白水解酶。可使纤维蛋白分解成纤维蛋白降解物,而使纤维蛋白溶解。主要用于血栓栓塞性疾病,也可作为抗凝血药治疗的辅助药。


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